蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)?蛋白質(zhì)的鹽析作用

編輯: 逍遙路 關(guān)鍵詞: 初中化學(xué) 來源: 高中學(xué)習(xí)網(wǎng)

【實驗原理】

鹽析現(xiàn)象是指—般蛋白質(zhì)在高濃度鹽溶液中溶解度下降,故向其溶液中加入中性鹽至一定濃度時,蛋白質(zhì)即自溶液中沉淀析出。鹽析作用與兩種因素有關(guān):

①蛋白質(zhì)分子被濃鹽脫水;

②分子所帶電荷被中和。

蛋白質(zhì)的鹽析作用是可逆過程,用鹽析方法沉淀蛋白質(zhì)時,較少引起蛋白質(zhì)變性,經(jīng)透析或用水稀釋時又可溶解。

鹽析不同的蛋白質(zhì)所需中性鹽濃度與蛋白質(zhì)種類及pH有關(guān)。分子量大的蛋白質(zhì)(如球蛋白)比分子量小的(如清蛋白)易于析出。球蛋白在半飽和硫酸銨溶液中即可析出,而清蛋白需在飽和硫酸銨溶液中才能析出。

【 試劑 】

1.雞蛋清的氯化鈉溶液(一份雞蛋清加10份的0.9%氯化鈉溶液)

2.固體硫酸銨

3.10%氫氧化鈉溶液

4..1%硫酸銅溶液

【實驗操作】

1.取雞蛋清氯化鈉溶液約2ml于 試管 中,加入硫酸銨粉末,至硫酸銨飽和不再溶解為止,此時溶液顏色為乳白色,用濾紙過濾。

2.取濾液做雙縮脲反應(yīng),檢查濾液中有無蛋白質(zhì)存在。

蛋白質(zhì)沉淀用1ml 蒸餾 水溶解后作雙縮脲反應(yīng),證明鹽析的蛋白質(zhì)重新溶解于水而未引起變性。試管編號1234567

磷酸溶液的濃度(mol/L)124681012

磷酸溶液的加入量(滴)1 1 1 1111

混合溶液的PH值543.532.521.5

鹽析時(NH4)2SO4

飽和溶液的用量(滴)10766666


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