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1.概念:按照人們的意愿,把一種生物的某種基因提取出來,加以修飾改造,然后放到另一種生物的細胞里,定向地改造生物的遺傳性狀。
高考生物知識點歸納
2.原理基因重組
3.工具:
A.基因的"剪刀":限制性內(nèi)切酶
、俜植迹褐饕谖⑸镏。
、谧饔锰攸c:特異性,即識別特定核苷酸序列,切割特定切點。
、劢Y(jié)果:產(chǎn)生黏性未端(堿基互補配對)。
B.基因的"針線":DNA連接酶
、龠B接的部位:磷酸二酯鍵,不是氫鍵。
、诮Y(jié)果:兩個相同的黏性未端的連接。
C.基因的"運載工具":運載體
、僮饔茫簩⑼庠椿蛩腿胧荏w細胞。
②具備的條件:a、能在宿主細胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存。b、具有多個限制酶切點。
c、有某些標記基因。
、鄯N類:質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。
、苜|(zhì)粒的特點:質(zhì)粒是基因工程中最常用的運載體。
4.基因操作的基本步驟:
①提取目的基因:人們所需要的特定基因,如人的胰島素基因、抗蟲基因、抗病基因、干擾素基因等
、谀康幕蚺c運載體結(jié)合(以質(zhì)粒為運載體):用同一種限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒DNA(運載體),使其產(chǎn)生相同的黏性末端,將切割下的目的基因與切割后的質(zhì);旌,并加入適量的DNA連接酶,使之形成重組DNA分子(重組質(zhì)粒)
、蹖⒛康幕?qū)胧荏w細胞常用的受體細胞:大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌、動植物細胞
④目的基因檢測與表達
檢測方法如:質(zhì)粒中有抗菌素抗性基因的大腸桿菌細胞放入到相應(yīng)的抗菌素中,如果正常生長,說明細胞中含有重組質(zhì)粒。
表達:受體細胞表現(xiàn)出特定性狀,說明目的基因完成了表達過程。如:抗蟲棉基因?qū)朊藜毎螅掴徬x食用棉的葉片時被殺死;胰島素基因?qū)氪竽c桿菌后能合成出胰島素等。
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