一、植物組織培養(yǎng)
考點(diǎn)解讀:①植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個體,體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性。②植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性必須滿足的條件包括:植物組織或細(xì)胞處于離體狀態(tài)下;外部環(huán)境條件適宜,如溫度、PH、光照、無菌操作;必要的營養(yǎng)條件,如水、有機(jī)營養(yǎng)、礦質(zhì)營養(yǎng)、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)和植物激素。③愈傷組織的細(xì)胞排列疏松、無規(guī)則,是高度液泡化的、呈無定型狀態(tài)的薄壁細(xì)胞,無葉綠體,不能進(jìn)行光合作用,需要從外界獲取有機(jī)營養(yǎng)。④脫分化,又叫去分化,是指由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程;再分化是指愈傷組織繼續(xù)培養(yǎng),重新分化成根或芽等器官的過程。⑤植物組織培養(yǎng)需要生長素和細(xì)胞分裂素,其中生長素可誘導(dǎo)愈傷組織生根,細(xì)胞分裂素可促進(jìn)愈傷組織生芽。⑥若制作人工種子,應(yīng)進(jìn)行到胚狀體階段;若獲得紫草素(代謝產(chǎn)物),應(yīng)進(jìn)行到愈傷組織階段。⑦單倍體育種首先要進(jìn)行花藥離體培養(yǎng),仍是采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),然后用秋水仙素處理,獲得純合子,后代無性狀分離,能夠穩(wěn)定遺傳,可明顯縮短育種年限。
二、植物體細(xì)胞雜交
考點(diǎn)解讀:①原生質(zhì)體的制備采用酶解法,即用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁,獲得有活力的原生質(zhì)體。②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,采用物理法(離心、振動、電激)或化學(xué)法(聚乙二醇PEG),原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁。③植物體細(xì)胞雜交的理論基礎(chǔ)為細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。它能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,打破物種之間的生殖隔離、擴(kuò)大遺傳重組范圍。④融合細(xì)胞的類型既有AB型雜種細(xì)胞,還能形成AA型和BB型兩種融合細(xì)胞,但只有AB型細(xì)胞是植物體細(xì)胞雜交所形成的雜種細(xì)胞,因此在雜種細(xì)胞形成后還應(yīng)有一個篩選過程。
三、動物細(xì)胞培養(yǎng)
考點(diǎn)解讀:①動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖,培養(yǎng)過程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,不涉及減數(shù)分裂。 結(jié)果是獲得細(xì)胞群。②用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理培養(yǎng)細(xì)胞,而不能用胃蛋白酶,消化處理時間要適當(dāng),否者會損傷細(xì)胞。③動物細(xì)胞培養(yǎng)液的成分包括糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等,由于動物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚,所以通常需要加入血清、血漿,以提供一個類似生物體內(nèi)的環(huán)境,此外動物血清中也包含了一些動物的激素和酶,可以促進(jìn)細(xì)胞的生長。④原代培養(yǎng)是指細(xì)胞懸浮液第一次在瓶中培養(yǎng),沒有分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng),即第1代細(xì)胞的培養(yǎng)與傳10代以內(nèi)的的細(xì)胞培養(yǎng);傳代培養(yǎng)是指細(xì)胞懸浮液培養(yǎng)一段時間后,分瓶再進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng),即傳10代以后的細(xì)胞培養(yǎng)。
四、動物體細(xì)胞核移植
考點(diǎn)解讀:①供體細(xì)胞一般選優(yōu)良動物的傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞,因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型。②選用去核卵母細(xì)胞的原因是其含有能促進(jìn)體細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì);營養(yǎng)物質(zhì)多,供胚胎早期發(fā)育;體積大,便于操作。③動物體細(xì)胞核移植技術(shù)利用動物細(xì)胞核的全能性,獲得克隆動物,屬于無性繁殖的方法。其主要應(yīng)用有:加速良種繁育;保護(hù)瀕危物種;生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;提供克隆組織、器官。④克隆動物的性狀與供體動物基本相同,少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動物相同,與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。
五、單克隆抗體的制備
考點(diǎn)解讀:①單克隆抗體是指由單個B細(xì)胞通過無性繁殖(克。┬纬杉(xì)胞群,由它們產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。②單克隆抗體制備過程中有兩次篩選,第一次篩選用選擇性培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞;第二次篩選通過抗體檢測篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。③雜交瘤細(xì)胞既能在體內(nèi)迅速大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。④單克隆抗體的制備原理為細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法包括物理方法(電刺激、離心、振動等)、化學(xué)方法(PEG處理)和生物方法(滅活的病毒處理)。⑤“生物導(dǎo)彈”是由抗癌細(xì)胞的單克隆抗體和放射性同位素、化學(xué)藥物或細(xì)胞毒素結(jié)合構(gòu)成,借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置,在原位殺傷癌細(xì)胞。
作者簡介:周偉,生物奧賽主教練。主要從事生物教學(xué)與奧賽培訓(xùn)研究,近年來在《生物學(xué)教學(xué)》、《中學(xué)生物教學(xué)》、《吉首大學(xué)學(xué)報(bào)》、《新高考》、《中學(xué)生理科應(yīng)試》、《青蘋果》、《當(dāng)代中學(xué)生報(bào)》、《考試報(bào)》、《素質(zhì)教育報(bào)》、《中學(xué)生理化報(bào)》、《中學(xué)生學(xué)習(xí)報(bào)》等報(bào)刊上發(fā)表文章100多篇。
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