1、抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。
2、單克隆抗體的制備
(1)制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原,然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞
(2)獲得雜交瘤細(xì)胞
①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合;
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
(3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)
(4)將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
(5)提取單克隆抗體:從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取
3、單克隆抗體的應(yīng)用
(1)作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。
(2)用于治療疾病和運(yùn)載藥物。
血清抗體與單克隆抗體的比較:
名稱 | 產(chǎn)生 | 特點(diǎn) |
血清抗體 | 由B淋巴 | 一般從血清中分離,產(chǎn)量低、純度低、特異性差 |
單克隆抗體 | 由雜交瘤細(xì)胞分泌 | 特異性強(qiáng),靈敏度高,能大量制備 |
知識(shí)點(diǎn)撥:
1、融合的結(jié)果是有很多不符合要求的;如有2個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等,所以要進(jìn)行篩選。
2、篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細(xì)胞。
3、雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。
4、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并能大量制備。
5、單克隆抗體的作用:作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其它疾病。
知識(shí)拓展:
制備單克隆抗體過(guò)程中的篩選:篩選是將未融合的B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞以及BB融合、瘤瘤融合的細(xì)胞通過(guò)選擇培養(yǎng)基淘汰,篩選出B瘤融合的細(xì)胞。篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測(cè)的辦法篩選出來(lái)。因?yàn)閺捏w內(nèi)取免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞時(shí)取出很多種,形成的雜交瘤細(xì)胞有很多種,所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
相關(guān)高中生物知識(shí)點(diǎn):植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
植物體細(xì)胞雜交技術(shù):
1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù):就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。
2、過(guò)程:
![](http://www.yy-art.cn/uploads/allimg/160211/0U3105393-0.png)
(1)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等。化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。
(2)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。
(3)植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株,而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。
(4)雜種植株的特征:具備兩種植物的遺傳特征,原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。
3、意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。
知識(shí)點(diǎn)撥:
1、體細(xì)胞雜交即兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞,不管染色體數(shù)、基因組數(shù)還是染色體組數(shù)都采用直接相加的方法。若一植物細(xì)胞含有2Ⅳ條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為Aabb,另一植物細(xì)胞含有2M條染色體,2 個(gè)染色體組,其基因型為ccDd,則新植株應(yīng)為四倍體,其體細(xì)胞中染色體數(shù)為2N+2M,基因型為AabbccDd。 2、用該過(guò)程培育新品種的過(guò)程中,遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德?tīng)柕倪z傳定律。只有有性生殖進(jìn)行減數(shù)分裂過(guò)程中才符合遺傳定律,而體細(xì)胞雜交沒(méi)有此過(guò)程。
3、植物體細(xì)胞雜交克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合范圍。.
知識(shí)拓展:
1、植物體細(xì)胞雜交包括植物體細(xì)胞(原生質(zhì)體)融合和雜種細(xì)胞培育成一個(gè)新植株的過(guò)程。融合的細(xì)胞有多種類型,必須經(jīng)過(guò)篩選,然后才能培育出我們所需要的雜種植株。
2、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中無(wú)有性生殖細(xì)胞的結(jié)合,屬于無(wú)性生殖。
3、從雜種植株的染色體組成上看,染色體數(shù)目增加,屬于染色體數(shù)目的變異。
相關(guān)高中生物知識(shí)點(diǎn):動(dòng)物細(xì)胞的融合
動(dòng)物細(xì)胞的融合:
1、動(dòng)物細(xì)胞融合:兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。
2、誘導(dǎo)方法:化學(xué)法(聚乙二醇),滅活的病毒,物理法(離心、振動(dòng)、電激等)。
3、動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。
動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:
細(xì)胞工程 | 植物體細(xì)胞雜交 | 動(dòng)物細(xì)胞融合 |
理論基礎(chǔ) | 細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性 | 細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性 |
融合前處理 | 酶解法去除細(xì)胞壁 | 注射特定抗原,免疫處理正常小鼠 |
誘導(dǎo)手段 | 物理法:離心、振動(dòng)、電激 | 物理法:離心、振動(dòng)、電激 化學(xué)法:聚乙二醇 生物法:滅活的病毒(滅活的仙臺(tái)病毒) |
誘導(dǎo)過(guò)程 | 第一步:原生質(zhì)體的制備(酶解法) 第二步:原生質(zhì)體融合(物、化法) 第三步:雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 第四步:雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定 | 正常小鼠免疫處理動(dòng)物細(xì)胞的融合 |
用途和意義 | 克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙, | (1)制備單克隆抗體 |
知識(shí)點(diǎn)撥:
動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。
知識(shí)拓展:
1、在誘導(dǎo)劑的作用下進(jìn)行細(xì)胞的誘導(dǎo)融合,形成的雜種細(xì)胞有三種:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細(xì)胞,所以需要用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
2、相比較植物體細(xì)胞雜交,動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理,其他物理化學(xué)誘導(dǎo)融合的方法與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中原生質(zhì)體融合方法相同。
本文來(lái)自:逍遙右腦記憶 http://www.yy-art.cn/gaozhong/310723.html
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