原理
植物的蒸騰作用,氣孔蒸騰占著重要的地位,而氣孔在葉面上的數(shù)目及孔度的大小與氣孔蒸騰的強(qiáng)度有密切的關(guān)系,因此了解氣孔在葉面上的分布和面積,對(duì)于理解植物的蒸騰作用著重要的意義。
單位面積上氣孔的數(shù)目可用顯微鏡數(shù)得每一視野中的數(shù)目,而后用物鏡測(cè)微尺量得視野的直徑,求得視野面積,由此而計(jì)算單位葉面上氣孔的數(shù)目。氣孔面積的測(cè)量借助于顯微鏡描繪器,在毫米方格紙上繪圖后求得。
儀器
顯微鏡 物鏡測(cè)微尺
繪圖儀(或顯微鏡描繪器) 載玻片、蓋坡片
毫米方格紙
操作步驟
1.測(cè)定氣孔數(shù)目及密度
將新鮮葉子上(或下)表皮制片,置于顯微鏡下計(jì)算視野中氣孔的數(shù)目(用低倍鏡還是用高倍鏡,決定于表皮上氣孔的數(shù)目),移動(dòng)制片,在表皮的不同部位進(jìn)行5?6次計(jì)數(shù),求其平均值。隨后用物鏡測(cè)微尺量得視野的直徑,則半徑r為已知,按公式S=r2(S為視野面積)計(jì)算視野面積,用視野中氣孔的平均數(shù)/視野面積,即可求出氣孔的密度,以“氣孔數(shù)/mm2”表示。
2.測(cè)量氣孔的面積要測(cè)量單位葉面上氣孔的總面積,只要測(cè)得一個(gè)氣孔的平均面積就可以了,因?yàn)閾?jù)上法已求得氣孔的密度。
用圖釘將毫米方格紙固定在顯微鏡右邊的桌面上,調(diào)節(jié)描繪器上的反光鏡,使成45°傾斜,然后調(diào)節(jié)光線亮度,使氣孔與毫米方格紙的形象在顯微鏡視野中重合,用鉛筆在方格紙上繪若干個(gè)氣孔圖,這樣放大后的氣孔在面積等于20mm2,要求出氣孔的實(shí)際面積,還必須知道顯微鏡的放大倍數(shù)。為此,取物鏡測(cè)尺置于顯微鏡下,如前法繪若干測(cè)微尺的刻度于方格線上,以確定放大后的測(cè)微尺每一刻度相當(dāng)于若干mm,由于物鏡微尺每一小格刻度的實(shí)際長度為10μm是已知的,所以顯微鏡的放大倍數(shù)即可求得。例如測(cè)微尺的每一刻度等于毫米方格紙上的5mm,那么顯微鏡的放大倍數(shù)即為500。
確定了長度的放大倍數(shù)后,還需要算出面積的放大倍數(shù),由上面可知實(shí)際面積為100μm2,放大后則得25mm2。用比例法即可求得氣孔的實(shí)際面積。
100∶25=X∶30
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