原理
植物色素包括脂溶性的葉綠體色素和水溶性的細(xì)胞液色素,前者存在于葉綠體,與光合作用有關(guān),如葉綠素;后者存在于液泡中,特別與花朵的顏色有關(guān),如花青素屬黃酮類物質(zhì)。了解它們的性質(zhì)有助于對其生理功能的理解。
儀器藥品
分光計(jì) 天平
研缽 分液漏斗
移液管 量筒
吸球 試管
碳酸鈣 氫氧化鉀
丙酮 乙醚
甲醇 鹽酸
醋酸銅
操作步驟
1.葉綠體色素的提取
取菠菜(或其他植物)葉子2g,放在研缽中,加石英砂和碳酸鈣少許,丙酮約5ml,研磨成勻漿,再加丙酮15ml,則得深綠色提取液,用漏斗過濾之,即為色素提取液。
2.葉綠素的熒光現(xiàn)象
取上述色素丙酮提取液少許于試管中,用反射光和透射光,觀察提取液的顏色有無不同,反射光觀察到的溶液顏色,即為葉綠素產(chǎn)生的熒光顏色。
3.光對葉綠素的破壞作用
取上述色素丙酮提取液少許,分裝在2支試管中,1支試管放在黑暗處(或用黑紙包裹),另1支試管放在強(qiáng)光下(太陽光),經(jīng)2─3小時后,觀察兩支試管中溶液的顏色有何不同?
4.銅在葉綠素分子中的替代作用
取上述色素丙酮提取液少許于試管中,1滴1滴加入濃鹽酸,直至溶液出現(xiàn)褐綠色,此時葉綠素分子已遭破壞,形成去鎂葉綠素。然后加醋酸銅晶體1小塊,慢慢加熱溶液,則又產(chǎn)生鮮亮的綠色。此即表明銅已在葉綠素分子中替代了原來鎂的位置。
5.黃色素和綠色素的分離
取上述色素丙酮提取液10ml,加到盛有20ml乙醚的分液漏斗中,搖動分液漏斗,并沿漏斗邊緣加入30ml蒸餾水,輕輕搖動分液漏斗,靜置片刻,溶液即分為兩層。色素已全部轉(zhuǎn)入上層乙醚中,棄去下層丙酮和水,再用蒸餾水沖洗乙醚溶液1─2次。然后于色素乙醚溶液中加入5ml30%KOH甲醇溶液,用力搖動分液漏斗,靜置約10分鐘,再加蒸餾水約10ml,搖動后靜置分離,則得到黃色素層和綠色素層,分別保存于試管中。
6.觀察色素溶液的吸收光譜。
(1) 調(diào)節(jié)分光計(jì),觀察電燈光的光譜。
(2) 觀察色素丙酮提取液,用丙酮將溶液稀釋1倍比較之。
(3) 觀察黃色素乙醚溶液,用乙醚將溶液稀釋1倍比較之。
(4) 觀察皂化葉綠素甲醇溶液,用甲醇將溶液稀釋1倍比較之。
(5) 觀察被光破壞的色素丙酮溶液,試與(2)作比較。
(6) 觀察被銅取代了鎂的色素溶液。
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