南海海洋所海洋病毒編碼的miRNA研究取得突破進(jìn)展

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中科院海洋生物資源可持續(xù)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(依托于南海海洋研究所)秦啟偉研究員領(lǐng)導(dǎo)的團(tuán)隊(duì),在海洋病毒編碼的miRNA研究方面取得突破性進(jìn)展。團(tuán)隊(duì)成員閆陽(yáng)博士等首次鑒定并驗(yàn)證了一種新的海洋病毒??石斑魚(yú)虹彩病毒能夠編碼功能性miRNA。研究成果已于近日發(fā)表在國(guó)際知名的綜合類(lèi)學(xué)術(shù)期刊《公共科學(xué)圖書(shū)館?綜合》(Yan,etal.2011.IdentificationofaNovelMarineFishVirus,SingaporeGrouperIridovirus-EncodedMicroRNAsExpressedinGrouperCellsbySolexaSequencing.PloSONE.2011.6(4):e19148)。

虹彩病毒(iridovirus)是一類(lèi)廣泛感染無(wú)脊椎和低等水生脊椎動(dòng)物的大分子DNA病毒,對(duì)海洋野生動(dòng)物種群和海水養(yǎng)殖動(dòng)物造成極大威脅。石斑魚(yú)虹彩病毒(Singaporegrouperiridovirus,SGIV)是該團(tuán)隊(duì)從海水養(yǎng)殖石斑魚(yú)體中分離出的一種新的高致病性虹彩病毒,是中國(guó)和東南亞海水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)最重要的病毒性病原之一。然而,目前對(duì)SGIV感染致病的分子機(jī)理尚不十分清楚,缺乏有效的防治手段。

病毒編碼的miRNA研究方興未艾,因其長(zhǎng)度較短、沒(méi)有免疫原性等特點(diǎn)而成為治療疾病的新型靶點(diǎn)。團(tuán)隊(duì)為揭示SGIV在其感染過(guò)程中是否編碼miRNA,將感染了SGIV不同時(shí)期的石斑魚(yú)胚胎細(xì)胞混合后構(gòu)建小RNA庫(kù),進(jìn)行Illumina/SolexaRNA深度測(cè)序。通過(guò)一系列生物信息學(xué)分析,最終確定16條SGIV編碼的miRNA序列,其中一條與2型單純皰疹病毒編碼的miR-H4-5p具有高度同源性,提示miRNA在遠(yuǎn)緣病毒種中具有一定的保守性。這16個(gè)新發(fā)現(xiàn)的miRNA散在分布于SGIV基因組中,其中三個(gè)定位于ORF057L。同時(shí)發(fā)現(xiàn)SGIV編碼的miRNA在其3'端或5'端存在序列或長(zhǎng)度的異質(zhì)性,可能會(huì)影響其與靶基因的識(shí)別。熒光定量PCR及熒光素酶報(bào)告基因分析了這16個(gè)miRNA的表達(dá)水平和潛在的生物學(xué)活性,證實(shí)其中11個(gè)miRNA確實(shí)存在于SGIV感染的石斑魚(yú)胚胎細(xì)胞中,并發(fā)揮生物學(xué)功能。

以前只有人類(lèi)和哺乳動(dòng)物編碼miRNA的研究報(bào)道,其中報(bào)道較多的為皰疹病毒科的各成員。該研究首次在國(guó)際上證實(shí)了海洋病毒也可以編碼功能性miRNA,將miRNA研究推向了一個(gè)新的層次。

該項(xiàng)研究受到國(guó)家杰出青年基金、國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究計(jì)劃(“973”計(jì)劃)和中科院知識(shí)創(chuàng)新工程重要方向項(xiàng)目資助。

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