摘要：

中科院大連化學(xué)物理研究所鄒漢法、吳仁安研究員等人采用該所張濤研究員研究組所制備的碳介孔材料(OMC)，成功發(fā)展了血漿中內(nèi)源性多肽的高選擇性富集與分離鑒定的新方法。該項(xiàng)成果作為VIP論文發(fā)表在Angew.Chem.Int.Ed.（2011，50，12218-12221）。


血漿中多肽的分離鑒定對(duì)于疾病標(biāo)志物的篩選和早期診斷具有重要意義。然而，血漿復(fù)雜的成分組成和多肽、蛋白質(zhì)極高的含量動(dòng)態(tài)范圍，對(duì)內(nèi)源性多肽的高效富集和分離鑒定形成了巨大的困難。中科院大連化學(xué)物理研究所鄒漢法、吳仁安研究員等人采用該所張濤研究員研究組所制備的碳介孔材料(OMC)，成功發(fā)展了血漿中內(nèi)源性多肽的高選擇性富集與分離鑒定的新方法。該項(xiàng)成果作為VIP論文發(fā)表在Angew.Chem.Int.Ed.（2011，50，12218-12221）。

碳介孔材料(OMC)具有高度的有序性、孔分布和很強(qiáng)的疏水性表面，由于蛋白質(zhì)等生物大分子(≥15000Da）與多肽分子（≤10000Da）的體積差異，通過(guò)體積排阻效應(yīng)可以將蛋白質(zhì)等生物大分子排阻在介孔外無(wú)法得到有效的吸附，而低分子量的多肽被可以進(jìn)入介孔內(nèi)獲得有效的吸附，從而在高度復(fù)雜的血漿中實(shí)現(xiàn)內(nèi)源性多肽的高效率、高選擇性富集。

研究人員選擇BSA(bovineserumalbumin）酶解的多肽作為標(biāo)準(zhǔn)樣品考察OMC的吸附性能，發(fā)現(xiàn)其富集多肽的效果與常用的C18固相萃取柱的吸附效果相當(dāng)；但與C18固相萃取方法相比較，OMC富集方法進(jìn)一步引入了體積排阻作用，能較好地消除血漿中蛋白質(zhì)等生物大分子對(duì)多肽吸附的干擾。將所建立的富集方法應(yīng)用于血清中內(nèi)源性多肽的富集，所富集的多肽由多維色譜-高分辨質(zhì)譜（2DLC-MS/MS）分離鑒定，可在3mL血清中鑒定到790個(gè)非冗余多肽，比現(xiàn)有的方法提高了2-3倍；進(jìn)一步應(yīng)用于20µl血清中內(nèi)源性多肽的分離分析，共鑒定了3402個(gè)內(nèi)源性血漿多肽，這是目前血清中內(nèi)源肽的最高靈敏度的富集鑒定策略。

這一結(jié)果充分表明，OMC富集血清中的內(nèi)源性多肽具有極高的效率，有利于實(shí)現(xiàn)微量樣品中多肽的高效、高選擇性分離鑒定。該新方法可以廣泛應(yīng)用于其它生物樣品中多肽的分離鑒定，為闡明疾病發(fā)生的機(jī)制和標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)提供了新的分析策略和途徑。


本文來(lái)自：逍遙右腦記憶 http://www.yy-art.cn/gaozhong/890286.html

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