高中生物DNA粗提取與鑒定方法

編輯: 逍遙路 關(guān)鍵詞: 高中生物 來源: 高中學(xué)習(xí)網(wǎng)

高中化學(xué)dna的粗提取與鑒定學(xué)習(xí)方法一提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對(duì)于dna的粗提取而言,就是要利用dna與rn

高中化學(xué)dna的粗提取與鑒定學(xué)習(xí)方法一

提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對(duì)于dna的粗提取而言,就是要利用dna與rna 蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取dna,去除其他成分。

1高中生物dna的溶解性

dna和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的nacl溶液中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使dna充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。

2高中生物dna對(duì)酶 高溫和洗滌劑的耐受性

蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對(duì)dna沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oc的高溫,而dna在80oc以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對(duì)dna沒有影響。

3高中生物dna的鑒定

在沸水浴條件下,dna遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。

4實(shí)驗(yàn)材料的選取

凡是含有dna的生物材料都可以考慮,但是使用dna含量相對(duì)較高的生物組織,成功的可能性更大。

5破碎細(xì)胞,獲取含dna的濾液

在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,加入一定的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。

6去除濾液中的雜質(zhì)

方案一的原理是dna在不同濃度nacl溶液中溶解度不同;方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì),不分解dna;方案三的原理是蛋白質(zhì)和dna的變性溫度不同。

特別提醒:

①為什么反復(fù)地溶解與析出dna,能夠去除雜質(zhì)?

用高鹽濃度的溶液溶解dna,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使dna析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出dna,就能夠除去與dna溶解度不同的多種雜質(zhì)。

②方案二與方案三的原理有什么不同?

方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白,從而使提取的dna與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是dna和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性,與dna分離。

7高中生物dna的析出與鑒定

將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等 冷卻的酒精溶液

向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑;旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜诜兴屑訜5min,待試管冷卻后,比較兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有dna的溶液是否變藍(lán)。

8以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)

每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉防止血液凝固。

9二苯胺試劑

要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會(huì)影響鑒定的效果。

10dna的溶解度與nacl溶液濃度的關(guān)系:

當(dāng)nacl溶液濃度低于0.14mol/l時(shí),隨濃度的升高,dna的溶解度降低;當(dāng)nacl溶液濃度高于0.14mol/l時(shí),隨濃度升高,dna的溶解度升高,實(shí)驗(yàn)選用2mol/lnacl和0.015mol/lnacl做溶解試劑。

11盛放雞血細(xì)胞液的容器

最好是塑料容器。

高中化學(xué)dna的粗提取與鑒定學(xué)習(xí)方法二

項(xiàng)目方法步驟添加物質(zhì)及目的操作要求及目的
取用與要求目的要求目的
制備雞血細(xì)胞液(教師準(zhǔn)備)取0.1g/ml的檸檬酸鈉100ml于500ml燒杯中,加雞血180ml抗凝緩慢攪拌混勻血液與檸檬酸鈉,防血凝
離心或置于冰箱使血細(xì)胞與血漿分離
1.提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)20ml蒸餾水促進(jìn)血細(xì)胞吸水破裂,釋放核物質(zhì)攪拌:單向 快速 5min加速血細(xì)胞破裂
過濾:1-2層紗布濾取含dna的濾液
2.溶解細(xì)胞核內(nèi)的dna2mol/l的nacl溶液40ml溶解dna攪拌:單向 緩慢 1min促進(jìn)dna溶解
3.析出含dna的黏稠物加蒸餾水至黏稠物不增加為止降低nacl溶液濃度,析出dna攪拌:單向 輕輕混勻溶液,促進(jìn)析出完整dna分子
4.濾取含dna的黏稠物

3層~4層紗布過濾獲取含dna的黏稠物
5.將dna的黏稠物再溶解2mol/l的nacl溶液20ml再溶解dna單向攪拌使黏稠物盡可能多地溶解于溶液中
6.過濾含有dna的氯化鈉溶液

3層~4層紗布過濾濾取含dna的濾液
7.提取含雜質(zhì)較少的dna加入冷卻的 體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精50ml讓部分雜質(zhì)溶于酒精,析出含雜質(zhì)較少的dna攪拌:單向促進(jìn)雜質(zhì)溶解 dna析出
用玻璃棒卷起絲狀物,用濾紙吸水獲得dna(白色乳狀絲狀物)
8.dna的鑒定向2支20ml試管各加0.015mol/l的nacl溶液一支對(duì)照,一支溶解dna(作溶媒)攪拌促進(jìn)dna溶解
各加4ml二苯胺試劑作為dna鑒定劑沸水浴5min,冷卻觀察顏色dna所在試管溶液變藍(lán)色

到了高中,你首先要明確的一點(diǎn)就是,在高中,學(xué)習(xí)的科目沒有大科、小科之分,只有高考和非高考科目之分。比如對(duì)于理傾學(xué)生來說,語數(shù)外、理化生是高考科目,其他為非高考科目;對(duì)于文傾學(xué)生來說,語數(shù)外、政史地是高考科目,其他為非高考科目。因此,如果大家把生物當(dāng)成初中的小科,當(dāng)成文科來看待,指望考前背一背,可以這樣說,這種情況下你的高中生物是根本學(xué)不好的。如果你指望生物考前背背就可以考高分,那是天方夜譚!可以毫不夸張地說,在高中尤其是在生物考試中,你也很難取得高分,更何況你考前背背呢。

生物學(xué)習(xí)方法小經(jīng)驗(yàn)

1、考試范圍:必修二全冊(cè)和必修三第一、二章。試卷上有50道選擇題共50分,簡答題50分,其中包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一道

2、復(fù)習(xí)注意:首先是下功夫,扎實(shí)細(xì)致地進(jìn)行復(fù)習(xí),投入的時(shí)間和精力總是能反映在成績上的。其次是注意生物復(fù)習(xí)方法,牢固掌握基礎(chǔ)知識(shí),特別是基本概念和基本原理,要在理解的基礎(chǔ)上進(jìn)行記憶;有針對(duì)性的多做一些習(xí)題,對(duì)做錯(cuò)的習(xí)題所涉及的知識(shí)點(diǎn)要特別注意復(fù)習(xí)鞏固、加深理解,避免再次出錯(cuò);翻閱以前的習(xí)題、試卷,對(duì)一些以前出錯(cuò)的題重復(fù)做一遍;考試時(shí)先做簡單的題目,先把穩(wěn)得的分得到,仔細(xì)審題,抓住要點(diǎn)。

3、生物是一個(gè)偏文的學(xué)科,因此有些知識(shí)點(diǎn)一定要記扎實(shí),“當(dāng)背則背”,沒有商量的余地。它不像數(shù)學(xué)、物理,掌握一個(gè)公式、定理,就能在做題是有很大的發(fā)揮空間。生物往往會(huì)要求你一字不差的答出某概念,比如,問:能釋放抗體的細(xì)胞是什么?答案應(yīng)為漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞亦可),但不可以答“B細(xì)胞”,又如,問:少量生長素可促進(jìn)生長,過量生長素會(huì)抑制生長,這種現(xiàn)象說明?應(yīng)答生長素具有兩重性,答“雙重性”就一分也沒有唉。因?yàn)閲?yán)密是生物科的特點(diǎn),一個(gè)概念,差之毫厘的結(jié)果---往往是謬以千里。這又恰恰體現(xiàn)了理科科目的嚴(yán)謹(jǐn)。


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