識別細(xì)菌、酵母菌、放線菌和霉菌四大類微生物的菌落特征。
觀察實驗：
一、觀察內(nèi)容：
1．觀察已知菌的菌落的形態(tài)、大小、色澤、透明度、致密度和邊緣等特征。
2．根據(jù)菌落的形態(tài)特征判斷未知菌的類別。
二、實驗材料和用具：
大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、粘紅酵母、熱帶假絲酵母、細(xì)黃鏈霉菌、灰色鏈霉菌、黑曲霉、產(chǎn)黃青霉、球孢白伍菌等細(xì)菌的斜面菌種。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基、高氏1號培養(yǎng)基、無菌水。接種環(huán)、接種針、酒精燈、無菌培養(yǎng)皿多套、電熱恒溫箱。
三、操作步驟
(一)制備已知菌的單菌落
1．制備平板將已融化的無菌培養(yǎng)基待冷卻至50℃左右，分別制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基平板和高氏1號培養(yǎng)基平板各一皿。
2．制備菌懸液或孢子懸液在培養(yǎng)好的斜面菌種管內(nèi)加入5mL無菌水，制成菌懸液后備用。
3．制備單菌落通過平板劃線法獲得細(xì)菌、酵母菌和放線菌的單菌落。用三點接種法獲得霉菌的單菌落。細(xì)菌于37℃恒溫培養(yǎng)24～48h，酵母菌于28℃培養(yǎng)2～3d，霉菌和放線菌置28℃培養(yǎng)5～7d，待長成菌落后，仔細(xì)觀察四大類微生物菌落的形態(tài)特征，并將觀察結(jié)果記錄于表中。
(二)制備未知菌落
l．倒平板
2．接種可用彈土法接種，其要點為：采集校園土壤，待風(fēng)干磨碎后，可將細(xì)土撒在無菌的硬板紙表面，先彈去紙面浮土，然后打開皿蓋，便含土的紙面對著平板培養(yǎng)基的表面，用手指在硬板紙背面輕輕一彈即可接種上各種微生物。
3．培養(yǎng)將牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板倒置于37℃培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)2～3d，將馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基倒置于28℃培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)3～5d，即可獲得未知菌的單菌落。
4．編號從培養(yǎng)好的未知平板中，挑選8個不同的單菌落，逐個編號，根據(jù)菌落識別要點區(qū)分未知菌落類群，并將判斷結(jié)果填入表4～2中。
(三)直接觀察菌落直接用實驗3中的“土壤稀釋分離”獲得的單菌落進(jìn)行觀察識別，并將結(jié)果填入表4-2中。
四、注意事項觀察菌落特點時，要選擇分離得很開的單個較大菌落；已知菌落和未知菌落要編好號，請勿隨意移動開蓋，以免搞混菌號。
五、實驗報告
細(xì)菌菌落特征：凝膠狀、表面較光滑、濕潤、與培養(yǎng)基結(jié)合不緊密，易挑取，正反顏色一致。
酵母菌菌落特征（與細(xì)菌相似)：比細(xì)菌大而厚，不透明，表面光滑、濕潤、粘稠，易用針挑起。多呈乳白色。
放線菌菌落特征：致密、堅硬、多皺、不易用針挑起，不透明。孢子成熟后，表面粉末狀，干燥(常有土腥味)。
霉菌菌落特征：比細(xì)菌菌落大，由細(xì)菌組成疏松的絨毛狀，絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀，有的無固定大小，延至整個培養(yǎng)基中產(chǎn)色素，使菌落顯色。
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