四、實(shí)驗(yàn)中常用器材和藥品的使用
1、NaOH:用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H
2、Ca(OH)2:鑒定CO2
3、CaCl2:提高細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性
4、HCl:解離(15%)或改變?nèi)芤旱膒H
5、NaHCO3:提供CO2、作為酸堿緩沖劑
6、酸堿緩沖劑(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于調(diào)節(jié)溶液pH
7、NaCl:配制生理鹽水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
8、瓊脂:激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基,用于激素的轉(zhuǎn)移或培養(yǎng)基
9、酒精:用于消毒(75%)、提純DNA(95%)、葉片脫色、配制解離液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)
10、蔗糖:配制蔗糖溶液,測定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原
11、二苯胺:用于DNA的鑒定(沸水浴,藍(lán)色)
12、甲基綠:檢測DNA,呈綠色
13、吡羅紅:檢測RNA,呈紅色
14、苔黑酚乙醇溶液:用于RNA的鑒定
15、斐林試劑(甲液0.1g/mLNaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏試劑:鑒定可溶性還原性糖(沸水浴,磚紅色沉淀)
16、雙縮脲試劑:用于蛋白質(zhì)的鑒定(紫色)
17、蘇丹Ⅲ染液(橘黃色)和蘇丹Ⅳ染液(紅色):用于脂肪鑒定
18、碘液:用于鑒定淀粉(變藍(lán)色)
19、龍膽紫溶液或醋酸洋紅:堿性染料,用于染色體染色時(shí),前者呈深藍(lán)色,后者呈紅色
20、改良苯酚品紅染液:檢測染色體,紅色
21、健那綠B:檢測線粒體,專一性讓線粒體染色呈藍(lán)綠色
22、重鉻酸鉀溶液:檢測酒精,呈灰綠色
23、溴麝香酚藍(lán)水溶液:檢測CO2,由藍(lán)變綠再變黃
24、吲哚酚試劑:用于維生素C的鑒定
25、伊紅美藍(lán):鑒定有無大腸桿菌的存在
26、亞甲基藍(lán):用于活體染色或檢測污水中的耗氧性細(xì)菌(細(xì)菌的氧化可使之褪色)
27、pH試紙:檢驗(yàn)物質(zhì)的酸堿性,如乳酸
28、卡諾氏固定液:用于細(xì)胞有絲分裂根尖的固定
29、解離液(5%鹽酸和95%酒精按1:1的比例配成):有絲分裂中根尖的分離與固定
30、層析液:用于葉綠素的分離,主要類型:①由20份石油醚(在60~90℃下分餾出來的)、2份丙酮和1份苯混合而成;②95%的酒精;③93號汽油;④9份體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精和1份苯混合;⑤汽油或四氯化碳加少許無水硫酸鈉。
31、20%新鮮肝臟研磨液:含有H2O2酶,可促進(jìn)H2O2分解產(chǎn)生O2
32、無土營養(yǎng)液:用于植物無土栽培
33、檸檬酸鈉:血液抗凝劑
34、結(jié)晶紫:用于自生固氮菌的分離
35、秋水仙素(C22H25O6N):用于單倍體育種,作用機(jī)理是可抑制植物細(xì)胞有絲分裂中紡綞體的形成,可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍。是1937年發(fā)現(xiàn)的,是從百合科植物秋水仙的種子和球莖中提取出來的一種植物堿。它是白色或淡黃色的粉末或針狀結(jié)晶,有劇毒,使用時(shí)應(yīng)特別注意。
36、濾紙:過濾或紙層
37、紗布、尼龍布:過濾,遮光
38、云母片:阻止生長素傳遞
39、微電流計(jì):測量神經(jīng)元受刺激時(shí),神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間的興奮傳遞情況
五、一些常見的實(shí)驗(yàn)方法
1、根據(jù)顏色來確定某種物質(zhì)的存在:
淀粉+I2(藍(lán)色);還原性糖+斐林試劑(磚紅色);
脂肪+蘇丹Ⅲ(橘黃)或+蘇丹Ⅳ(紅色);蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑(紫色);
大腸桿菌+伊紅和美藍(lán)(菌落為深紫色,有金屬光澤)。
2、用顏色標(biāo)記法來確定原腸胚三個(gè)胚層的分化情況。
3、用熒光標(biāo)記法來證明細(xì)胞膜具有一定的流動性。
4、同位素示蹤法:光合作用產(chǎn)生氧氣的來源;光合作用中二氧化碳的去向;
噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì),蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì);
DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制;泌蛋白的形成過程。
5、確定某種元素為植物生長必需的元素的方法:
水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液一次對照,缺素與加進(jìn)去某元素后二次對照)。
6、獲得無籽果實(shí)的方法:
用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄的子房,如無籽蕃茄;
誘導(dǎo)染色體變異,如無籽西瓜;用赤霉素處理如無籽葡萄;無性繁殖獲取香蕉。
7、確定某種激素功能的方法:
飼喂法,切除注射法,閹割移植法,切除口服法。
8、確定傳入、傳出神經(jīng)的功能:
刺激+觀察效應(yīng)器的反應(yīng)或測定神經(jīng)上的電位變化。
9、植物雜交的方法:
雌雄同花:花蕾期去雄+套袋+開花期人工授粉+套袋;
雌雄異花:花蕾期雌花套袋+開花期人工授粉+套袋。
10、確定某一顯性個(gè)體基因型的方法:
測交;該顯性個(gè)體自交,水稻可用花粉鑒定法。
11、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法:
具有一對相對性狀的純合體的雜交,子一代所表現(xiàn)的一個(gè)親本形狀及為顯性,
自交,觀察后代是否有性狀分離,若分離原性狀為顯性。
12、確定某一性狀受核基因還是質(zhì)基因控制:正反交。
13、確定某一性狀基因在常染色體上還是在性染色體上:兩親本雜交的子一代該性狀在雌雄兩性間比例是否相同,若相同為常染色體,否則在性染色體,或用正反交法。
14、確定某一性狀受核基因確定某一個(gè)體是否具有抗性基因的方法:
確定小麥?zhǔn)欠窬哂锌逛P病基因,用銹病菌去侵染,一段時(shí)間后,觀察有無銹斑出現(xiàn)。
15、鑒定血型的方法:用標(biāo)準(zhǔn)血清與待測血型混合,在顯微鏡下觀察血液的凝集情況。
16、育種的方法:雜交育種;人工誘變育種;單倍體育種;基因工程育種;細(xì)胞工程育種;多倍體育種等。
17、測定種群密度的方法:樣方法(植物);標(biāo)志重捕法(動物);顯微計(jì)數(shù)法(微生物)。
18、生態(tài)瓶的制作方法:瓶必須透明,且封閉,放置在散射光下,動物耐受性要強(qiáng)。
19、分離微生物的方法:
平板劃線法;用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)(如:圓褐固氮菌的分離,金黃色葡萄球菌的分離,細(xì)菌和酵母菌的分離);液體稀釋法;菌絲尖端切割法。
20、測定微生物群體生長的方法:
測定細(xì)菌的數(shù)目:顯微計(jì)數(shù)或染色涂片計(jì)數(shù)法(紅細(xì)胞計(jì)數(shù)法)。
測定細(xì)菌的重量:取一定體積的培養(yǎng)基,經(jīng)離心分離,反復(fù)洗滌后,稱濕重,或烘干后稱干重。
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