2、步驟:(一)洋蔥根尖的培養(yǎng)
(二)裝片的制作
制作流程:解離→漂洗→染色→制片
1.解離:藥液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1:1混合液).
時間:3~5min.目的:使組織中的細(xì)胞相互分離開來.
2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色.
3.染色:用質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min
目的:使染色體著色,利于觀察.
4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.目的:使細(xì)胞分散開來,有利于觀察.
(三)觀察
1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。
2、換高倍鏡下觀察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。(注意各時期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點)。其中,處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。
考點提示:
(1)培養(yǎng)根尖時,為何要經(jīng)常換水?
增加水中的氧氣,防止根進(jìn)行無氧呼吸造成根的腐爛。
(2)培養(yǎng)根尖時,應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥?為什么?
應(yīng)選用舊洋蔥,因為新洋蔥尚在休眠,不易生根。
(3)為何每條根只能用根尖?取根尖的最佳時間是何時?為何?
因為根尖分生區(qū)的細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂;上午10時到下午2時;因為此時細(xì)胞分裂活躍。
(4)解離和壓片的目的分別是什么?壓片時為何要再加一塊載玻片?
解離是為了使細(xì)胞相互分離開來,壓片是為了使細(xì)胞相互分散開來;再加一塊載玻片是為了受力均勻,防止蓋玻片被壓破。
(5)若所觀察的組織細(xì)胞大多是破碎而不完整的,其原因是什么?
壓片時用力過大。
(6)解離過程中鹽酸的作用是什么?丙酮可代替嗎?
分解和溶解細(xì)胞間質(zhì);不能,而硝酸可代替。
(7)為何要漂洗?
洗去鹽酸便于染色。
(8)細(xì)胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么?
染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。
(9)若所觀察的細(xì)胞各部分全是紫色,其原因是什么?
染液濃度過大或染色時間過長。
(10)為何要找分生區(qū)?分生區(qū)的特點是什么?能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎?為什么?
因為在根尖只有分生區(qū)的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂;分生區(qū)的特點是:細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài);不能用高倍鏡找分生區(qū),因為高倍鏡所觀察的實際范圍很小,難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。
(11)分生區(qū)細(xì)胞中,什么時期的細(xì)胞最多?為什么?
間期;因為在細(xì)胞周期中,間期時間最長。
(12)所觀察的細(xì)胞能從中期變化到后期嗎?為什么?
不能,因為所觀察的細(xì)胞都是停留在某一時期的死細(xì)胞。
(13)觀察洋蔥表皮細(xì)胞能否看到染色體?為什么?
不能,因為洋蔥表皮細(xì)胞一般不分裂。
(14)若觀察時不能看到染色體,其原因是什么?
沒有找到分生區(qū)細(xì)胞;沒有找到處于分裂期的細(xì)胞;染液過;染色時間過短。
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