1、被子植物的花粉發(fā)育
(1)被子植物的雄蕊通常包含花絲、花藥兩部分;ㄋ帪槟覡罱Y(jié)構(gòu),內(nèi)部含有許多花粉。
(2)花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小包子四分體時(shí)期、單核期和雙核期等階段。
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2、產(chǎn)生劃分植株的兩種途徑:一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植株,另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成愈傷組織,再將其誘導(dǎo)分化成植株。
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兩種途徑之間沒有絕對(duì)的界限,主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。
3、影響花藥培養(yǎng)的因素:
(1)材料的選擇:一般來說,在單核期(通常是完全未開放的花蕾),細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時(shí)期,花藥成功率最高。
(2)培養(yǎng)基的選擇。
(3)此外,親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等對(duì)誘導(dǎo)成功率又一定影響。
4、材料選取方法:醋酸洋紅法和焙花青-鉻礬法
5、步驟:
材料的選取→材料的消毒→接種和培養(yǎng)→結(jié)果分析與評(píng)價(jià)
知識(shí)點(diǎn)撥:
1、材料的選擇要是選擇單核期以前的花藥接種,質(zhì)地幼嫩,極易破碎;選擇單核期以后的花藥接種,花瓣已有些松動(dòng),又給材料的消毒帶來困難,通常不選擇盛開或略微開放的花。
2、選擇月季花粉的最佳時(shí)期為完全未開放的花蕾。材料的選擇是花粉植株能否培養(yǎng)成功的主要影響因素之一,不同植物及同一植物的不同生理狀況誘導(dǎo)成功率都不相同。
3、選擇花藥時(shí),確定花藥發(fā)育時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法。某些植物的花粉不易著色需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。
4、材料的消毒過程:
花蕾用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30s→無菌水沖洗→吸干表面的水分,放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中2~4min→無菌水再?zèng)_洗3~5次。
5、接種和培養(yǎng)過程中注意的情況
在無菌條件下剝離花藥時(shí)要盡量不損傷花藥(否則接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織),同時(shí)還要徹底除去花絲。因?yàn)榛ńz的存在不利于愈傷組織或胚狀體的形成。
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