1、概念：使用固定化酶技術(shù)，將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上，再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi)，柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔，而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中，將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱，與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反應(yīng)柱的下端流出。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產(chǎn)成本，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。
2、固定方法：
| 名稱 | 原理 | 圖示 | 適用范圍 |
| 包埋法 | 將微生物細胞均勻地包埋在不溶于水的多孔性載體中 |  | 多用于細胞的固定 |
| 化學(xué)結(jié)合法 | 利用共價鏈、離子鍵將酶分子或細胞相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上 |  | 多用于酶的固定 |
| 物理吸附法 | 歐諾個過物理吸附作用，把酶固定在纖維素、瓊脂糖、多孔玻璃和離子交換樹脂等載體上 |  |
3、載體：包埋法 固定化細胞常用的是不容于水的多孔性載體材料，如明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。
4、優(yōu)點：
（1）固定化酶優(yōu)點：使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以被反復(fù)利用。
（2）固定化細胞優(yōu)點：成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化學(xué)反應(yīng)。
5、固定化沒的反應(yīng)實例??生產(chǎn)高果糖漿
（1）高果糖漿的生產(chǎn)原理
（2）葡萄糖異構(gòu)酶的固定：將葡萄糖異構(gòu)酶固定在顆粒狀載體上，裝入反應(yīng)柱中。
（3）高果糖漿的生產(chǎn)操作：（如圖）從反應(yīng)柱上端注入葡萄糖溶液，從下端流出果糖溶液，一個反應(yīng)拄可連續(xù)使用半年。
6、固定化細胞的應(yīng)用實例??固定化酵母細胞
知識點撥：
1、注意事項
（1）配制海藻酸鈉溶液：小火、間斷加熱、定容，如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。
（2）海藻酸鈉溶液與酶母細胞混合：冷卻后再混合，注意混合均勻，不要進入氣泡
（3）制備固定化酵母細胞：高度適宜，并勻速滴入
（4）剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間，以便Ca2+與Na+充分交換，形成的凝膠珠穩(wěn)定。檢驗?zāi)z珠是否形成，可用下列方法：用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手擠壓，如果不容易破裂，沒有液體流出就表明成功地制成了凝膠珠，還可以用手將凝膠珠在實驗桌上用力摔打，如果凝膠珠很容易彈起，也表明制備的凝膠珠是成功的。
（5）凝膠珠的顏色和形狀
如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低，固定的酵母細胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。
（6） 海藻酸鈉在水中溶解的速度較慢，需要通過加熱促進其溶解。溶解海藻酸鈉，最好采用小火間斷加熱的方法。例如，加熱幾分鐘后，從石棉網(wǎng)上去下燒杯冷卻片刻，并不斷攪拌，再將燒杯放回石棉網(wǎng)繼續(xù)加熱，如此重復(fù)數(shù)次，直至海藻酸鈉完全溶化。如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。
2、酵母菌活化時體積會變大，因此活化前應(yīng)選擇體積足夠大的容器，防止酵母菌細胞的活化液溢出。
3、海藻酸鈉溶液的配制是固定化酵母細胞的關(guān)鍵，因為如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠，如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數(shù)量少，也會影響實驗效果。
4、溶化海藻酸鈉時要用小火或間斷加熱，避免海藻酸鈉發(fā)生焦糊。
5、將溶化后的海藻酸鈉先冷卻至室溫，再與酵母菌混合，避免高溫殺死酵母細胞。
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